bueno, aki escribo algunas cosas que recebi desde un buen amigo mio que sabe como va la cosa con los "genericos" de china.
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" El Tops" azul;: IGF-1 LR3 En la aplicació
n anterior el cuerpo de la ciencia publicamo
s otro análisis de una muestra de IGF-1 LR3 que compramos en los Países Bajos y ése originado
s de China. ¡La resultó era un artículo muy peligroso que contuvo la insulina de la rata en vez de IGF-1 LR3! Esta vez detrás estamos haciendo análisis de la proteína. En este caso, estamos mirando otra vez IGF-1 LongR3. Obtuvimos este frasco de IGF-1LR3 de China, el país de fuente del principio de todo el IGF-1LR3. Hicimos nuestro mejor para escoger un producto que era popular, y éramos así represent
ante de la calidad de muchas muestras IGF-1LR3. Los resultado
s, trataban otra vez.
Cuando comenzamo
s a analizar esta nueva muestra, al principio encontrad
o le éramos IGF-1 este vez. Las grandes noticias, pero allí eran pronto grandes “PERO” que eran evidentes
. También encontram
os dos problemas: 1) la proteína es heterogén
ea como puede ser visto en el espectro de MALDI-MS. 2) el N-término no se podía resolver por la huella digital de la masa del péptido usando ASP-n. Podríamos cubrir la secuencia del residuo 58-83, pero no a partir de 1-57. Por lo tanto, no podríamos excluir que el N-término se pudo modificar de alguna manera. Puesto que donde está sure intacto eso el C-término él puede ser que seamos provechos
os analizar la secuencia del N-terminal de la proteína por la degradaci
ón de Edman. Esto podía explicar probablem
ente la heterogen
eidad de la proteína. Decidíamo
s dejar el laborator
io analizar la secuencia del N-terminal de la muestra de IGF-1 LR3. El de secuencia principal estaba de acuerdo con la secuencia original. Encontrar
on los aminoácid
os M-F-P-A-M-P-L. Había también señales de menor importanc
ia en cada paso pero estas señales no se podrían relaciona
r clarament
e con ninguna secuencia de IGF-1 LR3. Ahora habíamos demostrad
o que la n y el C-término de la proteína son aceptable
s. Sigue habiendo algunos problemas: no podríamos explicar la heterogen
eidad de la proteína en MALDI-MS. En segundo lugar, no vimos dos péptidos previstos del N-terminal en la huella digital de la masa del péptido que es una indicació
n clara que hay intercamb
ios en la secuencia
.
Es difícil especular qué sucedió exactamen
te con el IGF-1. De acuerdo con la detección total por MALDI-MS uno puede concluir que no contiene la secuencia exacta, y puesto que el C-término completo fue explicado, esta desviació
n debe estar en la región del N-terminal (no en el N-término según lo probado por Edman que ordena). Si utilizára
mos otras enzimas para la fragmenta
ción y MALDI-MS/MS para la identific
ación de los péptidos inexplica
dos podríamos probablem
ente identific
ar el entero ordenamos
. Sin embargo, esto costaría demasiado más dinero. Y puesto que donde ya capaz de probar que esta muestra no era un producto puro y por lo tanto no activo, nosotros decidíamo
s dejarlo estar. Pedimos el laborator
io en Alemania para funcionar un SDS-PAGE también y resultó que la muestra no fue contamina
da. También los pedimos para buscar BSA. Puesto que sabíamos que BSA está agregado a muchas solucione
s de la proteína (e.g. anticuerp
os) para la estabiliz
ación.
¡Sin embargo, éstas no son drogas usadas en ser humano! Pero sabemos que los laborator ios subterrán eos también compran péptidos contamina dos baratos de BSA (albúmina del suero vacuno) y vendemos esto a sus clientes. Como la mayor parte de usted sabrá, la mayoría de los péptidos (hormonas de crecimien
to - IGF-1 Lr3 - los factores de crecimien
to pegylated etc) se venden en una forma liofiliza
da (una corteza presionad
a liofiliza
da del polvo seco) en una pequeña botella, sobre todo con un casquillo azul. Es por lo tanto imposible decir quién fabricó originalm
ente esta botella. Pero no vimos ninguna component
es de molecular
idad elevada como la albúmina bovina (del ganado) en esta muestra, como puede ser visto en el SDS-PAGE
Aqui va una imagen, pero no puedes verla.Tendras que registrate o acceder[/img][/img][/img][/img]